试剂空白是指测试过程中，由于测试试剂本身带来的微小正误差。理论上，所有终点法测试需从测试结果中扣除试剂吸光度。测量时，将正常测试的试剂和样本量替换为蒸馏水进行测量，所得即为试剂空白。低浓度测试时，需从结果中减去试剂空白值，影响显著；高浓度测试时，则影响较小。

测定试剂空白值时，使用去离子水模拟样本，加入测试试剂，按步骤进行常规测试。最终结果中减去试剂空白值。不同批次试剂空白值可能不同，使用新批次时需重新测定。

在传统手工操作中，每个测试需做三个管：测定管、标准管、空白管，其中空白管为试剂加蒸馏水，测量值即为试剂空白。操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异要求每次测定均需测定试剂空白。

全自动分析仪上，通常模拟手工操作，但在追求速度设计上采用折中方法测定试剂空白。某些分析仪无法实现实时测定，故在定标时预先保存试剂空白值，使用时减去。对于稳定试剂，此法对结果影响不大。

自动生化仪上，试剂空白常表现为零点吸光度，通过校准确立。样本空白则在测试中使用特定样本浓度作为仪器零基准，抵消样品色度或浊度对测试结果的影响。此影响来源于溶血、脂血、黄疸等情况，测量样本空白能去除这部分影响。

在双试剂测试中，加入试剂1和样本后的吸光度能部分扣除样本空白。优质试剂具有较强的抗干扰能力，通过特定反应消除样本空白。现代全自动生化仪大多采用双波长测定，通过选择特定波长和计算两波长吸光度差值，扣除样本空白。

某些仪器设有“血清信息”功能，单独占用空白通道计算，即样品空白校准。使用样品空白对测试仪器调零后，只有样本与测试试剂反应产生的色度被测定。因样本背景色度和浊度差异，样品空白用于校正仪器。

总结而言，试剂空白和样本空白的概念在于，空白=只含试剂/样本的空白吸光度。水空白则为比色杯加入水后的吸光度，用于检查光路系统，消除“杯差”。